培養(yǎng)基中丙酮酸鈉的作用是什么？

    丙酮酸鈉可以作為細(xì)胞培養(yǎng)中的替代碳源，盡管細(xì)胞更傾向于以葡萄糖作為碳源，但是，如果沒有葡萄糖的話，細(xì)胞也可以代謝丙酮酸鈉。丙酮酸鈉的貯存液濃度一般為50mM，-20℃保存，培養(yǎng)基中的終濃度為1mM.

     丙酮酸鈉是zui常見的丙酮酸鹽，是一類內(nèi)源性小分子物質(zhì)，丙酮酸鈉和丙酮酸均是天然存在于人體內(nèi)，并參與全身各組織和器官的代謝。丙酮酸鈉在醫(yī)學(xué)上、診斷試劑以及醫(yī)療器械中被廣泛用作緩沖劑、賦形劑和抗氧化劑。此外丙酮酸鈉在細(xì)胞培養(yǎng)中也是常用到的試劑之一，那么丙酮酸鈉在細(xì)胞培養(yǎng)中的作用是什么呢？

    酮酸鈉在細(xì)胞培養(yǎng)中的作用：丙酮酸鈉在人體日常生活中，是惹你進(jìn)行代謝生命活動(dòng)所必須的，它是一種能量物質(zhì)，在科學(xué)研究進(jìn)行的細(xì)胞培養(yǎng)試驗(yàn)中，科學(xué)研究工作人員還發(fā)現(xiàn)了有作用類似的物質(zhì)，類似參與身體代謝活動(dòng)的為人體提供行動(dòng)的能量的物質(zhì)還有葡萄糖，乳酸鈉等，在人體中大多數(shù)細(xì)胞只利用葡萄糖就夠了，在細(xì)胞培養(yǎng)中丙酮酸鈉是必須的物質(zhì)。丙酮酸鈉在培養(yǎng)基中起到替代碳源的作用，參與細(xì)胞營養(yǎng)代謝。

    丙酮酸鈉制備：

    將領(lǐng)取的丙酮酸在車間內(nèi)放置一小時(shí)以上，將抽料管用干凈的聚酯纖維布包住管口，緩緩插入桶底部，用真空將丙酮酸 280kg抽入丙酮酸鈉反應(yīng)罐內(nèi)，抽畢，開攪拌，開攪拌，將預(yù)處理好的38~42℃碳酸鈉溶液緩緩壓至反應(yīng)罐內(nèi)（控制壓力在0.03~0.06MPa），控制反應(yīng)罐內(nèi)溫度不超過35℃（若反應(yīng)過程中，溫度超過35℃，應(yīng)采取降溫措施），反應(yīng)過程中應(yīng)進(jìn)行pH值檢測，當(dāng)反應(yīng)液pH值達(dá)到4.8~5.3（用精密試紙測定）時(shí)停止加料，控制加料時(shí)間約1小時(shí)，反應(yīng)完畢，將1440kg 95％乙醇緩緩抽入（管口應(yīng)用干凈的聚酯纖維布包?。┓磻?yīng)罐內(nèi)（加入時(shí)速度應(yīng)先慢后快，開始50%的量加入時(shí)間應(yīng)控制在60分鐘內(nèi)，后50%的量加入時(shí)間控制在30分鐘內(nèi)），抽畢，離心甩干，放入不銹鋼桶內(nèi)送入烘房，倒入雙錐真空干燥箱內(nèi)，控制真空度≥－0.09Mpa，熱水溫度為75~80℃，真空干燥器內(nèi)溫上升為65℃時(shí)，記錄起烘時(shí)間，控制真空干燥器內(nèi)溫度為65~70℃，保溫2小時(shí)，自起烘2小時(shí)后，請驗(yàn)，干失≤0.5%，冷卻約20分鐘，出料，用20目過篩，包裝，入庫。收率應(yīng)在105±5%之間。
 
    Hank's 平衡鹽溶液（HBS）要在空氣中使用，不需要CO2培養(yǎng)箱。原因是什么？Hank's 平衡鹽溶液（HBS）和Earle's平衡鹽溶液（EBS）有什么本質(zhì)的功能差別？

    HBS和 EBS 的主要差別在于碳酸氫鈉的水平,在Eagles （2.2g/L）中比在Hanks （0.35g/L） 中高。碳酸氫鈉需用高水平的CO2平衡，以維持溶液的PH值。Eagles液在空氣水平的CO2 中，溶液會(huì)變堿，Hanks液在CO2培養(yǎng)箱中會(huì)變酸。如果希望在CO2培養(yǎng)箱中保存組織，需要用Eagles液，。如果僅僅是清洗將要在細(xì)胞培養(yǎng)基中儲(chǔ)存的組織，用Hanks液就可以了。