昨日上午，有位客戶我公司“在線客服”中到我司業(yè)務(wù)員何，想要訂購(gòu)人IRAK試劑盒，對(duì)實(shí)驗(yàn)曲線問(wèn)題作出疑問(wèn)。對(duì)此，何將問(wèn)題轉(zhuǎn)至技術(shù)部，技術(shù)員針對(duì)這一問(wèn)題作出解析：利用什么方程擬合ELISA曲線較合適？
用于免疫檢測(cè)的所謂“標(biāo)準(zhǔn)曲線”其實(shí)稱為擬合曲線比較合適。免疫檢測(cè)時(shí)標(biāo)準(zhǔn)點(diǎn)(可以是倍比稀釋的，也可以不是)濃度如果和相應(yīng)的吸光度(OD)值如果能夠呈現(xiàn)直線關(guān)系當(dāng)然是的了，這時(shí)可以通過(guò)EXELL等方便的獲得擬合曲線，進(jìn)而推算出樣品的濃度值。但我們做免疫檢測(cè)很少有時(shí)候能夠有這么理想的情況，標(biāo)品濃度和相應(yīng)OD值往往是"S"型的曲線關(guān)系，這時(shí)就不能用直線擬合的方式了，而對(duì)擬合方法進(jìn)行選擇就是必要的了。
關(guān)于標(biāo)準(zhǔn)曲線的擬合方式，直線、二次曲線、三次曲線、指數(shù)、對(duì)數(shù)等雖都可用于ELISA及其它生物學(xué)反應(yīng)中的曲線擬合，但都只適用于曲線的一部分，有的適用于前半段，有的適用于后半段，有的適用于中間一段，而Logistic曲線則對(duì)曲線的全部都有較好的適用性。當(dāng)然，如果用于定量，還是在中間一段較好。這些方法雖然沒(méi)有一種方法可以通用，但也都可以用。關(guān)鍵在于你的標(biāo)準(zhǔn)曲線做到了S形的哪一部分，你想檢測(cè)的樣品濃度在曲線的哪一部分。在S曲線的低濃度部分可以用乘冪方程很好的擬合，中低濃度部分可以用直線方程，中間部分可用對(duì)數(shù)方程，而中后段可用四參數(shù)。
目前上zui流行的免疫檢測(cè)擬合方式是“四參數(shù)邏輯擬合”，用這種擬合方式往往能夠比較的反映濃度和吸光度的曲線關(guān)系，從而進(jìn)一步比較正確的獲得樣品中待測(cè)物質(zhì)的濃度值。
其實(shí)，在一個(gè)長(zhǎng)的區(qū)間內(nèi)，Logistic應(yīng)該都能擬合得較為理想。但并不是說(shuō)它就是的。事實(shí)上不僅是ELISA，其它很多生物學(xué)反應(yīng)都是S形曲線，也都可以用Logistic曲線擬合。但建模型是一回事，而用它來(lái)定量是另一回事。如果用來(lái)定量，S形曲線的中間段(較陡處)是比較好的，而兩端的平坦部分計(jì)算誤差會(huì)大，有時(shí)甚至?xí)艽蟆?br /> 上海恒遠(yuǎn)ELISA試劑盒的每道工序都嚴(yán)格按照國(guó)家檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行，質(zhì)量保證的同時(shí)，價(jià)格也相當(dāng)實(shí)惠，并且當(dāng)您遇到試驗(yàn)中的任何不明白的問(wèn)題，都可以免費(fèi)24小時(shí)咨詢，我們將竭盡全力為您解決問(wèn)題。
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